一、产品简介：

　　通过测定必定体积培育液中所含菌丝的量来响应微生物的成优点境。设施是，取必定量的待测培育液（如10毫升）放正在有刻度的离心管中，设定必定的离心时分（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大范围工业发酵坐蓐上微生物成长的一个紧张监测目标。这种设施斗劲粗放，轻易，火速，但须要设定相似的打点前提，不然谬误很大，因为离心浸淀物中搀杂有少少固体养分物，结果会有必定谬误。

　　称干重法：可用离心或过滤法测定。日常干重为湿重的10-20%。正在离心法中，将必定体积待测培育液倒入离心管中，设定必定的离心时分和转速，举行离心，并用净水离心洗涤1-5次，举行干燥。干燥可用烘箱正在105 ℃或100℃下烘干，或采用红表线℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，正在40C下举行真空干燥。称干重发法较为啰嗦，时时获取的微生物产物为菌体时，常采用这种设施，如活性干酵母（activity dry yeast, ADY）,少少以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。

　　比浊法：微生物的成长惹起培育物浑浊度的增高。通过紫表分光光度计测定必定波长下的吸光值，判决微生物的成优点境。对某一培育物内的菌体成长作守时跟踪时，可采用一种特造的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其成长情形，而不必取菌液。该法闭键用于发酵工业菌体成长监测。如我所操纵UNICO公司的紫表-可见分光光度计，正在波长600nm 处用比色管守时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控i的成长及诱导时分。

　　菌丝长度丈量法：对待丝状真菌和少少放线菌，能够正在培育基上测定必守时分内菌丝成长的长度，或是欺骗一只一端启齿并带有刻度的细玻璃管，到入相宜的培育基，卧放，正在启齿的一端接种微生物，一段时分跋文实其菌丝成长长度，借此权衡丝状微生物的成长。

　　血球计数板法:血球计数板是一种有格表机闭刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，重心有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表貌高0.1 mm，每个平台上刻有差别规格的格网，重心0.1 mm面积上刻有400个幼方格。通过油镜考察，统计必定大格内微生物的数目，即可算出1毫升菌液中所含的菌体数。这种设施轻易，直观，急切，但只适宜于单细胞形态的微生物或丝状微生物所发作的孢子举行计数，而且所得结果是蕴涵死细胞正在内的总菌数。

　　染色计数法：为了添补少少微生物正在油镜下不易考察计数，而直接用血球计数板法又无法区别死细胞和活细胞的亏损，人们出现白染色计数法。借帮差此表染料对菌体举行得当的染色，能够更利便的正在显微镜下举行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后正在显微镜下考察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。

　　比例计数法：将已知颗粒（如霉菌孢子或红细胞）浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按必定比例匀称搀杂，正在显微镜视野中数出各自的数量，即可得未知菌液的细胞浓度。这种计数设施斗劲粗放。而且须要配造已知颗粒浓度的悬液做模范。

　　液体稀释法：对未知菌样做延续十倍系列稀释，按照估量数，从最适宜的三个延续的10倍稀释液中各取5毫升试样，接种1毫升到3组共15只装培育液的试管中，经培育跋文实每个稀释度映现成长的试管数，然后查z大或然数表MPN（most probably number）得出菌样的含菌数，按照样品稀释倍数计较出活菌含量。该法常用于食物中微生物的检测，比如饮用水和牛奶的微生物限量检验。

　　平板菌落计数法：这是一种最常用的活菌计数法。将待测菌液举行梯度稀释，取必定体积的稀释菌液与相宜的固体培育基正在固结前匀称搀杂，或将菌液涂布于已固结的固体培育基平板上。保温培育后，用平板上映现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。日常以直径9cm的平板上映现50-500个菌落为宜。但设施斗劲困难，操作家需有熟练的工夫。平板菌落计数法不但能够得出菌液中活菌的含菌数，况且同时将菌液中的细菌举行了一次星散培育，得到了单克隆。

　　试剂纸法：正在平板计数法的根底上，繁荣了幼型商品化产物以供火速计数用。样子有幼型厚滤纸片，琼脂片等。正在滤纸和琼脂片中吸有相宜的培育基，个中插手活性指示剂2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC，无色）待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培育。短期培育后正在滤纸上映现必定密度的玫瑰色轻微菌落与模范纸色板上图谱斗劲即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数急切确实，比拟而言避免了平板计数法的人工操作偏差。

　　膜过滤法：用分表的滤膜过滤必定体积的含菌样品，经丫叮橙染色，正在紫表显微镜下考察细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。

　　心理目标法：微生物的成长伴跟着一系列心理目标爆发蜕化，比如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产胸宇等，与成长量相平行的心理目标许多，它们可动作成长测定的相对值。

　　测定含氮量：大无数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。按照含氮量×6.25，即可测定粗卵白的含量。含氮量的测定设施有许多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测N2气法。Dumas测N2气法是将样品与CuO搀杂，正在CO2气流中加热后发作氮气，搜罗正在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。

　　测定含碳量：将少量（干重0.2-2.0 mg）生物资料混入1毫升水或无机缓冲液中，用2毫升2%的K2Cr2O7溶液正在100 C下加热30分钟后冷却。加水稀释至5毫升，正在580nm的波长下读取吸光光度值，即可算计出成长量。需用试剂做空缺对比，用模范样品做模范弧线。

　　还原糖测定法：还原糖时时是指单糖或寡糖，能够被微生物直接欺骗，通过还原糖的测定可间接响应微生物的成优点境，常用于大范围工业发酵坐蓐上微生物成长的惯例监测。设施是，离心发酵液，取上清液，插手斐林试剂，开水浴煮沸3分钟，取出加少许盐酸酸化，插手Na2S2O3邻近尽头时插手淀粉溶液，持续加Na2S2O3至尽头，查表读出还原糖的含量。

　　氨基氮的测定：设施是，离心发酵液，取上清液，插手甲基红和盐酸作指示剂，插手0.02N的NaOH调色至色彩刚才褪去，插手底物18%的中性甲醛，反响数刻，插手0.02N的使之变色，按照NaOH的用量折算出氨基氮的含量。按照培育液中氨基氮的含量，可间接响应微生物的成优点境。

　　其他心理物质的测定：P，DNA，RNA，ATP，NAM（乙酰胞壁酸）等含量以及产酸，产气，产CO2（用标志葡萄糖做基质），耗氧，黏度，产热等目标， 都可用于成长量的测定。也能够按照反响前后的基质浓度蜕化，最终产胸宇，微生物活性三方面的测定响应微生物的成长。如我所正在BMP-2的发酵坐蓐上，随时监测溶氧量的蜕化和酸碱度的蜕化，判决细菌的长势。

　　微生物的检测，其繁荣对象是火速，确实，轻易，自愿化，现在许多生物成品公司欺骗古板微生物检测道理，联合差此表检测设施，安排了样子各异的微生物检测仪器修立，正逐渐普通利用于医学微生物检测和科学切磋规模。比如：

　　1、抗扰乱培育基和微生物数目火速检测工夫联合处分了古板微生物检测门径不行处分的困难，为开发一套完善的抗扰乱微生物检测体例奠定了坚实的根底。中科院广州分院协作者当处供给的抗扰乱微生物培育基，新型生化审定管，微生物计数卡，情况质料检测试剂盒等，可利便的用于多项检测。

　　2、BACTOMETER 全自愿种种总菌数及火速细菌检测体例能足数幼时内得到监测结果，样本色彩及光学特点都不影响读数，对酵母和霉菌检测同样高度敏锐道理是欺骗电阻抗法（IMPEDANCE TECHNOLOGY）将待测样本与培育基置于反响考剂盒内，底部有一对不锈钢电极，测定因微生物成长而发作阻抗改革。如微生物成长时可将培育基中的大分子养分物经代谢改造为活动幼分子，电阻抗法可测试这种轻微蜕化，从而比古板平板法更火速监测微生物的存正在及数目。测定项目蕴涵总生菌数，酵母菌，大肠杆菌群，霉菌，乳酸菌，嗜热菌，革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌等。